Beginilah caraku mengisolasi jamur makro atau jamur pelapuk putih:
- Sampel dicari dari lapang, yaitu tubuh buah jamur atau miselium jamur yang tumbuh pada sisa-sisa bahan organik yang melapuk.
- Siapkan medium PDA yang diberi antibiotik kemicetin. Antibiotik ini banyak dijual diapotik-apotik.
- Medium ini dituang ke dalam cawan petri steril.
- Bersihkan sampel tersebut dari tanah atau dari kotoran lain. Saya cukup membersihkannya dengan tangan saja (sudah dicuci dengan alkohol tentunya dan aseptis).
- Secara aseptis sampel jamur dipotong kecil-kecil. Kalau badan buah cukup besar, ambil bagian yang paling dalam atau bagian yang tidak kontak dengan luar. Kalau sampelnya kecil, cukup dipotong-potong saja.
- Secara aseptis masukkan potongan tubuh buah/miselium jamur tersebut ke dalam cawan yang telah berisi medium PDA. Buat beberapa kali ulangan, jangan hanya satu.
- Inkubasi cawan tersebut dalam posisi terbalik.
- Setiap hari diamati pertumbuhan jamur yang kita isolasi. Biasanya dalam waktu 2 -3 hari jamur sudah mulai tumbuh.
- Segera pisahkan jamur tersebut ke dalam medium PDA yang lain. Ulangi langkah ini hingga diperoleh isolat jamur yang murni dan terbebas dari kontaminan.Biasanya pada sub kultur terakhir tidak dipakai antibiotik kemicetin.
- Jamur yang sudah berhasil diisolasi segera diperbanyak dan disimpan.
Biasanya sangat sulit mendapatkan isolat jamur makro dari sampel tanah. Saya pernah mencoba berulang kali, tetapi tidak berhasil. Cara paling mudah untuk mengisolasi jamur makro adalah dari tubuh buahnya.
Dengan metode ini saya sudah berhasil mengisolasi beberapa jamur yang aku peroleh dari lapang.
[isroi]
Berbagi Tak Pernah Rugi 
Cukup menarik practise ini : saya ingin mengisolasi jamur Aspergillus sp.
a. Bagaimanakah caranya ?
b. Bahan apa saja yang diperlukan, di toko apa mendapatkannya
dan berapa kira-kira harganya?
Maaf saya baru dalam praktek biokimia :
c. Medium PDA itu apa, mendapatkannya di mana ?
d. Secara aseptis itu bagaimana prakteknya?
e. Inkubasi itu bagaimana prakteknya? Alat, kontrol (suhu, udara) ruangannya?
Terima kasih.
Bung Syamsul Arifin,
Sebenarnya kalau Anda mau pergi ke perpustakaan kampus, saya yakin ada buku yang menjelaskan tentang ini. Biasanya di buku Mikrobiologi dasar. Dulu ada buku terbitan gramedia, judulnya sama Praktikum Mikrobiologi Dasar. Ringkasnya saya sebutkan di sini. Jelasnya cari di buku-buku tersebut ya…
Semoga bisa memberi pencerahan.
A. Aspergillu apa dan untuk apa?
Aspergillus sp mikroba umum di tanah dll. Anda mencari Aspergillus apa. Kalau ada roti atau nasi yang berjamur berwarna merah/jingga itu adalah Aspergillus. Di tanah lebih banyak lagi.
Jadi yang pertama ditentukan adalah mau cari aspergillus apa dan untuk apa? karena genus aspergillus memiliki anggota keluarga yang banyak sekali.
B. Tentukan sampelnya
Kalau mau cari aspergillus tanah ya..ambil sampel tanah. Kira-kira begitu.
C. Medium PDA
Medium PDA adalah medium umum singkatan dari potato dekstrose agar. Resep umumnya ada di buku, cari sendiri ya…. Tapi di laboratorium saya sering memodifikasinya: untuk kentang bisa beli kentang di pasar, untuk dekstrose bisa diganti dengan gula pasir, untuk agar bisa beli agar batangan di super market. jadi harganya murah sekali.
Kalau mau yang instant ada juga, bisa beli di toko kimia/penjual bahan-bahan laboratorium. Harganya sekitar Rp. 600 – 1000/kg.
Untuk mengurangi kontaminasi bakteri gunakan antibiotk bakteri, bisa pake kemicitin. Ada di apotik-apotik.
Setelah PDA dibuat, kemudian disterilkan dengan autoclav.
D. Pengenceran Serial
Sampel yang akan diisolasi diencerkan dengan menggunakan larutan garam fisiologis 85% (pake garam NaCl saja). Larutan garam ini disterilkan. Lalu sampel diencerkan dengan tingkat pengenceran 100,1000, 10000, sampai 100.000.000.
E. Aseptis
Artinya dilakukan dengan meminimalisir kontaminasi dari luar. Cara ini mungkin kalau ditulis bisa beberapa lembar, tetapi kalau dipraktekan sebenarnya sederhana saja.
Misal:
– gunakan api bonsen
– gunakan penutup mulut
– gunakan alkohol 70% untuk membersihkan tangan dan tempat kerja
– lakukan di dalam laminar flow kalau ada atau engkas juga bisa
Semua pekerjaaan dilakukan isolasi mikrob harus secara aseptis.
F. Alat-alat yang diperlukan
– cawan petri untuk tempat menumbuhkan mikroba
– autoclav untuksterilisasi
– laminar flow/engkas tempat kerja
– kertas untuk bungkus cawan petri
– erlenmeyer
– timbangan analitik
– alumunium foil
– pipet mikro/batang 1 ml
– bulp kalau menggunakan pipet batang
– kapas
– alkohol 70%
– kantong plastik tahan panas
– dll
Banyak banget kan. Ngak cukup dijelaskan di sini. Cara paling mudah ya… ikut kuliah mikrobiologi dasar atau pelatihan mikrobiologi dasar dan baca buku tentang mikrobiologi dasar. Karena banyak banget. Semoga membantu.
isroi
Dari Syamsul Arifin via email:
Terima kasih sekali Bung Isroi,
nanti coba saya sempatkan cari bukunya.
Untuk instantnya saja, sebenarnya saya ingin praktek membuat etanol
dari singkong sebagaimana saya kirim email ke-2 kemarin sore.
Teorinya menurut informasi di Internet :
a. Ada yang pake Aspergillus sp. untuk mengurai pati menjadi gula > fermentasi > etanol
Tapi beli Aspergillus sp yang sudah jadi dimana? Berupa apa (serbuk atau cair)? Harganya kira-kira berapa ya?
b. Ada yang pake Enzim Amilase (Alfa-Amilase dan Gluko-Amilase) + Ragi Roti.
Nah ini juga, Alfa-Amilase dan Gluko-Amilase katanya diisolasi dari aktifitas Aspergillus.
Atau saran nih, Bung Isroi bisa buka lab saja ya,
untuk mengisolasi Aspergillus sp + Alfa-Amilase + Gluko-Amilase
Sepertinya, ke depan mikroba + enzim biologis itu bakal banyak diperlukan orang.
Jadi pebisnis deh Bung Isroi, kan ilmu sudah punya.
Mohon informasinya jika ada.
Terima kasih
Mas, klo mo cari buku2 yang berkualitas, klik aja di link ini. InsyaAllah buku2nya bisa bermanfaat.
Mas, klo identifikas jamur berfilament gimana? Apa saja yang menjadi karakteristik utamanya?
Oya, isolasi Aspergillus InsyaAllah aku dah pernah melakukan dan hasilnya lumayan. Walaupun blom sampai tingkat jenis identifikasinya. Harganya murah ko klo beli langsung (pesen lewat saya). Bentuknya sediaan (stock kultur) dalam tabung reaksi.
Untuk identifikasi, biasanya kami menggunakan buku Illustrated Genera of Imperfect Fungi Barnett and hunter. Kalau mau sampai ke spesies biasanya minta tolong ke Pak A. Rifai. Orang yang mengidentifikasi T. pseudokoningii Rifai.
isroi
itu untuk pembuatan pda perlu menggunakan kemicitin, penggunaannya gimana ? apa di campur dengan bahan lain kemudian dimasukan ke autoclave atau gimana ? dan perbandingan pengunaanya gimana ? sebagai contoh untuk 1 liter pda
Saya mau cari enzim alfa amilase+Gluco, sampai sekarang belum dapat. Ada yang atau dimana bisa saya dapatkan ?
ya kalo mau alfa amilase dari aspergillus
yang beli aja roti trus blender ampe hancur trus di busukin. kalo dah jamuran.
bubur roti tadi ditaburin di atas tepung gandum yang udah di kukus.
biar kapang tadi hidup terus.
kalo mau pake buat fermentasi pati sigkong ( bahan bioethanol) tinggal di taburin aja.
plus di kasih lagi sedikit tepung gandum buat bekal saat kapang tadi kerja.
kalo alfa amilasenya dari rhizopus
ya beli ragi tempe
trus kalo buat aktifin kapangnya tinggal di tabur di tepung kedelai yang udah di kukus
kalo mau di pake buat fermentasi ya di taburin
gitu kok repot
tapi namanya usaha yang berhubungan dengan produksi harus siap dengan segala resiko
kan gak mungkin ngebor pipa terus minyak bumi keluar.
pan ada proses nyari titiknya dulu and so on
kalo mau iseng and punya waktu luang liat aja di
http://www.reader-extract.tk
Untuk enzym alfa amilase yang sudah siap pake bisa dilihat di situsnya PT Kreatif Energi Indonesia. Rasanya mereka mengecer enzym-enzym ini.
Ass.W.W.
Bagaimana prosedur Uji Uji Bavendamm?. Trimakasih. Wass.w.w.
Silahkan lihat di sini:
https://isroi.wordpress.com/2008/02/25/uji-bavendamm-beberapa-isolat-fungi/
Aww,
Pak saya berencana bertani organik utuk musim padi 2010. Saat ini saya mencoba mencari beberapa mikroba dekomposer, tricoderma dan mikoriza,
1. bagaimana saya bisa membiakkan mikroba ini dengan isolasi daritanaman?
2. dari tanaman apa mikroba ini di dapat?
mohon bantuannya.
Trimakasih
roni@jombang
Mas kompisisi kemicetin untuk mencampur PDA berapa yang biasa di pake? maksudnya untuk 1.000ml PDA kemicetin nya berapa kapsul?
Terus saya ingin mengisolasi jamur pada kayu gaharu. bagaimana caranya? karena pada kayu gaharu jamurnya hanya terlihat spora nya saja, tidak ada batang jamurnya…
Sekitar 10 ppm.
mas, dmn bisa mendapatkan jamurAspergillus niger dan Saccharomyces cereviceae ??
mohon informasinya. .
Saccharomyces cereviseae bisa pakai ragi roti. Aspergillus niger bisa beli di lab mikrobiologi IPB atau lab PAU IPB.
Saya sekarang sedang melakukan isolasi ganoderma dari tubuh buah. Tapi stelah sekian kali di ulang masih saja belum mendapatkan jamur yang dimaksud karena kontaminasi dengan jamur lain dan juga bakteri walau media pda nya telah diberi antibiotik. Yang mau saya tanyakan….
1. Jika kemicetin diganti amoxixilin apakah tidak apa2?
2. Bagaimana caranya memotong tubuh buah yang besar dengan teknik aseptis?
3. Apakah mas pernah mengisolasi ganoderma? jika pernah bagi2 dong foto2 nya baik yang makro maupun mikro……….ke alamat henny_mtbr@yahoo.com
Thanks atas jwbnnya…^_^,,,,^_^
Kemicetin digunakan untuk anti bakteri biar tidak terkontaminasi dengan bakteri.
Memang tidak mudah isolasi jamur dari lapang. Bisa dicoba dengan beberapa cara. Biasanya saya menggunakan cara seperti ini:
1. Cari tubuh buah jamur di lapang dan simpan di dalam kantong kertas. Jangan gunakan kantong plastik.
2. Cuci tubuh buah jamur dengan air steril beberapa kali. Jika perlu dicuci sekali diantaranya dengan larutan ethanol 70% untuk mengurangi kontaminan.
3. Secara aseptis potong-potong tubuh buah itu dan ambil tubuh buah bagian dalam sedemikian rupa yang kontaminannya sedikit.
4. Tumbuhkan potongan tubuh buah itu ke media PDA atau MEA.
5. Tunggu beberapa hari dan diamati setiap hari. Jika jamur mulai terlihat tumbuh dan terkontaminasi dengan jamur lain, segera pindahkan ke media baru secara hati-hati agar berkurang kontaminasinya. Lakukan langkah ini sampai diperoleh kultur asenik (kultur murni).
Semoga berhasil.
Isroi
Vote my pictures at Metro Photo Challenge
bagaimana dengan jamur makro lainnya? dan apakah ada literatur untuk mengidentifikasi jamur makroskopis hutan hujan tropis? mohon bantuannya.
thanks atas jawabannya…
Akan tetapi untuk memastikan jamur yang tumbuh itu benar2 jamur yang saya tanam( ganoderma,) saya memerlukan literatur. Jika mas ada koleksi foto2ny ( mikro) tolong kirim ke alamat saya di ats. Atau jika punya link terkait boleh dong dishare.
Mohon bantuannya…..
^_^
^_^
Pakai kunci determinasi jamur. Cari diperpustakaan. Dan, tumbhkan jamur itu sampai tumbuh tubuh buahnya. Dari tubuh buahnya sudah ketahuan apakah gonoderma atau bukan.
kalo isolasi jamur merang langsung dari jamurnya,, caranya gimana?
tolong bantuannya…
makasih sebelumnya… 🙂
sama seperti cara di atas.
Mas kalo sy mau isolasi jamur mikoriza sy harus mencari tanaman apa yg biasanya ditemukan jamur mikoriza di akarnya?
Mas, kalo saya mau beli jamur rhizopus sp untuk dibiakkan dimana beli nya??
tq