Tag Archives: aktivitas

Uji aktivitas beta glukosidase

Enzyme beta glucosidase adalah salah satu enzyme penting untuk menghidrolisis selulosa dalam pembuatan etanol dari biomassa lignoselulosa. Ada beberapa metode pengujian aktivitas enzyme beta glukosidase salah satunya menggunakan substrat p-nitrophenyl-B-D- glucopyranoside yang sering disingkat PNP-glu. Referensi dasarnya adalah Herr et al., 1978. Berikut ini penjelasan singkat uji aktivitas beta glukosidase dengan menggunakan PNP-glu sebagai substrate.

Substrat: 2mM PNP-glu dalam 5mM buffer sitrat pH 4.8
Catatan: buffer yang digunakan disesuaikan dengan pH dan buffer yang optimum untuk aktivitas enzyme yang akan diuji. Beberapa literatur menggunakan buffer pada pH 5, pH 4.5 dan lainnya.

Enzyme beta glucosidase: enzyme diencerkan dengan menggunakan buffer sitrat pH 4.8 5mM.
Aktivitas enzyme pada pengenceran ini kurang lebih 2-5 unit/ml. Kalau aktivitasnya belum diketahui perlu dicoba-coba dulu sampai ketemu pengenceran yang memberikan absorbansi di bawah 1.

Suhu: suhu pengujian disesuaikan dengan suhu optimum untuk aktivitas enzyme yang akan diuji, biasanya adalah 50 oC.
Continue reading

Advertisements

Resep Reagent DNS untuk Analisa Gula Pereduksi

Berikut ini resep reagent DNS untuk analisa gula pereduksi:

Campur dan larutkan:

  • Distilled water 1416 mL
  • 3,5 Dinitrosalicylic acid 10.6 g
  • Sodium hydroxide 19.8 g

Kemudian tambahkan:

  • Rochelle salts (sodium potassium tartrate) 306 g
  • Phenol (melt at 50oC) 7.6 mL
  • Sodium metabisulfite 8.3 g

Titrasi 3 mL sample dengan 0.1 N HCl dengan menggunakan phenolphthalein endpoint. Seharusnya membutuhkan 5-6 mL HCl. Tambahkan NaOH jika diperlukan (2 g = 1 mL 0.1 N HCL).

Referensi:

Miller GL: Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugar. Anal Chem 1959, 1:426-428.
NERL – Measurement of Cellulase Activities, August 1996
IUPAC – Measurement of Cellulase Activities

Download literatur lain: Download Referensi

Prosedur Pengukuran Aktivitas Enzyme Cellulase-IUPAC

Prosedur standard pengukuran aktivitas enzyme selulase (cellulase) IUPAC. Metode ini diadopsi juga oleh NREL. Silahkan didownload di link ini Aktivitas Enzyme Cellulase.

Prosedur pengukuran enzyme cellulase standard NREL.

Download buku dan referensi lain: Klik Di Sini.

Prosedur Analisis Aktivitas Enzyme Xylanase -IUPAC

Prosedur pengukuran aktivitas enzyme xylanase IUPAC. Silahkan didownload di link ini Aktivitas Enzyme Xylase IUPAC.

Metode analisa aktivitas enzyme xylanase yang lain silahkan download di sini: Aktivitas Enzyme Xylanase

Download buku dan referensi lain: Klik Di Sini.

Mengukur Aktivitas Enzim Xilanase

Berikut ini adalah metode standard untuk mengukur aktivitas enzim hemiselulase–>xilanase berdasarkan metode dari IUPAC. Semoga bermanfaat.

Klik di sini untuk mengunduh.